MeWo (人恶性黑色素瘤细胞)
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| 产品名称 | MeWo (人恶性黑色素瘤细胞) |
|---|---|
| 品牌 | 碧云天Beyotime |
| 货号 | C6573 |
| Organism | Tissue | Morphology | Culture Properties |
| Homo sapiens (Human) | skin, Derived from metastatic site: lymph node | fibroblast | adherent |
本细胞株详细信息如下:
| General Information | |
| Cell Line Name | MeWo (Human Malignant Melanoma Cells) |
| Synonyms | MEWO; Mewo; Me Wo; Me-Wo; Mevo; SK-MEL-MeWo; Mel-MeWo; BI-Mel; EST50 |
| Organism | Homo sapiens (Human) |
| Tissue | skin, Derived from metastatic site: lymph node |
| Cell Type | - |
| Morphology | fibroblast |
| Disease | malignant melanoma |
| Strain | - |
| Biosafety Level* | 1 |
| Age at Sampling | 78 years |
| Gender | male |
| Genetics | - |
| Ethnicity | Caucasian |
| Applications | 3D cell culture |
| Category | Cancer cell line |
* Biosafety classification is based onU.S. Public Health Service Guidelines,it is the responsibility of the customer to ensure that their facilities comply with biosafety regulations for their own country.
| Characteristics | |
| Karyotype | - |
| Virus Susceptibility | - |
| Derivation | The MeWo cell line was initiated by Y. Kodera and M. Bean in 1974 from lymph node tissue. Derived from metastatic site, lymph node |
| Clinical Data | 78 years male White |
| Antigen Expression | Blood type A; HLA A2, A26, Bw16, 18 |
| Receptor Expression | - |
| Oncogene | - |
| Genes Expressed | Blood type A; HLA A2, A26, Bw16, 18 |
| Gene expression databases | ArrayExpress; E-MTAB-783 ArrayExpress; E-MTAB-2706 ArrayExpress; E-MTAB-2770 ArrayExpress; E-MTAB-3610 GEO; GSM156016 GEO; GSM188224 GEO; GSM188254 GEO; GSM188313 GEO; GSM206525 GEO; GSM274688 GEO; GSM827470 GEO; GSM887310 GEO; GSM888386 GEO; GSM1670097 GEO; GSM3039511 GEO; GSM3039514 GEO; GSM3039515 |
| Metastasis | Lymph node |
| Tumorigenic | Yes |
| Effects | Yes, forms tumors in nude mice |
| Comments | - |
| Culture Method | |
| Doubling Time | - |
| Methods for Passages | Remove medium, and rinse with 0.25% trypsin, 0.03% EDTA solution. Remove the solution and add an additional 1 to 2 ml of trypsin-EDTA solution. Allow the flask to sit at room temperature (or at 37°C) until the cells detach.Add fresh culture medium, aspirate and dispense into new culture flasks. |
| Medium | EMEM+10% FBS |
| Special Remarks | - |
| Medium Renewal | Every 2 to 3 days |
| Subcultivation Ratio | 1:3 to 1:5 |
| Growth Condition | 95% air + 5% CO2, 37ºC |
| Freeze medium | EMEM+20% FBS+10% DMSO，也可以订购碧云天的 细胞冻存液(C0210) 。 |
本细胞株经过支原体检测(Mycoplasma Test)，检测结果为阴性。
本细胞株通过STR (short tandem repeats)鉴定，具体结果如下：
| D5S818 | D13S317 | D7S820 |
| D16S539 | vWA | THO1 |
| AM | TPOX | CSF1PO |
本细胞株的培养图片如下：
包装清单：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| C6573 | MeWo (人恶性黑色素瘤细胞) | 1支/瓶 |
| — | 说明书 | 1份 |
对于细胞培养瓶或离心管运输的活细胞，室温3-5天有效。对于干冰运输的冻存细胞，液氮保存，长期有效；-80℃保存，2个月有效。
注意事项：本细胞株未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。使用者在发表研究论文或结果时，应注明细胞株的来源。
本细胞株相关资料参考ATCC (American Type Culture Collection)、DSMZ (German Collection of Microorganisms and Cell Cultures)、JCRB (Japanese Collection of Research Bioresources Cell Bank)、Cellosaurus (Swiss Institute of Bioinformatics)等网站信息，并结合碧云天实际培养信息综合而成。由于细胞培养的条件、代数等因素，实际细胞可能与本说明书提供的信息有一定的差异，具体以实际细胞为准。
STR结果可以与ATCC、DSMZ及中国国家实验细胞资源共享平台等网站的数据库进行比对，匹配度80%以上即可认为该细胞系正确。
本产品会根据细胞是否正在培养、目的地距离等因素确定运输方式：冷冻的细胞冻存管(干冰)、一小瓶贴壁培养的细胞或一小瓶/管悬浮培养的细胞(常温)。为了更好地耐受长途运输和环境温度等变化，对于正常贴壁培养的细胞，也可能会以悬浮的形式培养在细胞培养瓶或离心管中进行运输。
对于干冰运输的冻存细胞，若干冰已经完全融化，请立即将细胞复苏培养，切勿再次低温冻存；若尚留有干冰，请直接复苏培养或立即将含有细胞的冻存管放入液氮中保存待用，切不可将细胞置于高温环境。
收到冻存的细胞后请尽快复苏细胞进行培养，以确认细胞活力、状态并保种。如暂时不进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃条件下保存2个月。
每支冻存管约含1×106个细胞，体积为0.5-1ml，预期存活率60-90%，建议复苏至1个6cm培养皿中。如果复苏后存活率较低，可以消化后转移至3.5cm培养皿中，这样细胞生长会更好。
如果本产品是常温运输，并且是培养瓶中充满完全培养液的贴壁细胞，收到细胞后请在显微镜下观察细胞生长状态，如果细胞密度超过85%请尽快进行传代操作；如果悬浮的细胞较多，请将培养瓶置于培养箱中静置过夜以使悬浮的细胞再次贴壁。如果收到的是常温运输的离心管装的悬浮细胞，可以直接取出转移至培养皿或培养瓶中培养。若培养液颜色正常则保留培养液继续培养，并且在首次更换培养液时，保留一半原培养液，并加入一半新鲜培养液，这样可以尽量避免由于培养液或血清差异导致细胞生长的不适应，确保细胞良好的生长状态。
细胞培养请在生物安全柜台中进行操作，并严格遵守无菌操作。
请在培养液中加入适量青霉素-链霉素溶液以防止可能的细菌污染，如碧云天的
青霉素-链霉素溶液(100X) (C0222)
。理论上永生化细胞可无限传代，但为了保证细胞的良好状态，建议最早培养的几代细胞就冻存一批，并每培养一段时间后复苏早期冻存的细胞进行培养。
接收、处理、保存、丢弃及使用细胞的时候要遵守相关法律法规，充分考虑可能存在的风险和责任，采取适当的安全和处理措施尽量降低对健康或环境的危害。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
1. 细胞株的复苏
a. 将冻存管在37℃水浴锅中迅速完全融化(保持冻存管的盖子在液面以上以防止污染)，并适当轻轻摇晃促融，切勿vortex。快速、完全融化可以提高细胞的复苏效果。
b. 打开冻存管前时用70%酒精擦拭细胞冻存管外壁，注意某些记号笔不耐酒精，小心标注的记号被擦拭掉。
c. 将完全融化的细胞直接离心，或者转移至无菌1.5ml或其它合适无菌离心管中，500×g离心2-5min，吸除上清，注意不要吸走细胞沉淀，然后用新鲜完全培养液重悬后转移至培养器皿，混匀，置于CO2培养箱37℃培养。
d. 第二天视贴壁或生长状态，更换培养液。
2. 贴壁细胞的常规传代流程
a. 将细胞培养液、PBS等放入37℃水浴锅内预热。
b. 以10cm细胞培养皿为例。吸出原培养皿中的培养液，用2-5ml无菌PBS润洗细胞1-2次以去除残留的血清(如果细胞贴壁较差，润洗时要轻柔以避免细胞飘起)，然后加1-2ml胰酶细胞消化液(含EDTA)室温消化，注意消化时间，通常为1-5分钟。如果细胞比较难消化，可以置于37℃细胞培养箱一定时间以加速消化。注意：消化时间过长，会导致传代后细胞出现生长状态不良的情况。
c. 每30秒-1分钟用显微镜观察细胞消化情况，贴壁细胞明显收缩、细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起，并用移液器吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来时，吸除胰酶细胞消化液，再加入1-2ml新鲜完全培养液，适当晃动细胞皿以终止胰酶作用，用移液器轻轻吹打贴壁的细胞，获取细胞悬液。吹打时需控制力度，避免产生大量气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~5个细胞培养皿内，加入新鲜培养液，置于CO2培养箱37℃培养，第2天观察细胞贴壁生长情况。
d. 也可以在消化后，加3-5ml完全培养液终止消化，用移液器轻轻吹打细胞悬液，尽量把细胞全部吹落、吹散，然后将全部细胞悬液500×g离心2-5min，离心后去上清，再用完全培养液重悬后转移到新的培养皿中，添加适量完全培养液，于CO2培养箱37℃培养。
e. 注意培养液的酚红颜色变化或根据细胞的换液要求定期换液，待细胞密度达到80-90%时需要传代或者冻存。如果没有及时传代导致细胞过密，传代后细胞容易出现生长状态不良的情况。
3. 悬浮细胞的常规传代流程
a. 将细胞悬液转移到无菌离心管内，500×g离心2-5min，弃去上清，加入新鲜的培养液，用吸管小心吹散沉淀，获取细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2-5个细胞瓶内，加入新鲜完全培养液，置于CO2培养箱37℃培养。
b. 也可以取少量悬浮细胞直接转移到新的培养瓶中，添加适当的新鲜完全培养液，置于CO2培养箱37℃培养。
c. 注意培养液的酚红颜色变化或根据细胞的换液要求定期换液，待细胞密度达到80-90%时可以考虑传代或者冻存。
4. 半贴壁半悬浮细胞的培养
a. 若悬浮细胞较多且折光率良好，可离心收集，继续培养。
b. 若仅有少量细胞悬浮，也可不用收集，传代操作按常规贴壁细胞操作流程处理。
c. 若悬浮细胞较多，离心收集，原瓶中贴壁细胞按照常规贴壁细胞操作流程进行消化、终止消化、吹打，并与之前收集的悬浮细胞混合，接种到新的细胞培养皿中。
5. 细胞株的冻存
a. 按照细胞传代方法收集细胞。
b. 细胞计数：一般要求冻存的细胞，每毫升的细胞数量为1×106-107个细胞。
c. 取适当细胞悬液，500×g离心2-5min，弃上清，加入细胞冻存液，重悬，转移到冻存管中，用记号笔标记好细胞株名称、冻存日期、代数等信息，并记录在相应表格中以便管理和快速查找细胞位置。
d. 将冻存管放入专用的细胞冻存盒中，-80℃过夜，然后转移至液氮灌中保存。如果没有专用的细胞冻存盒，可以按下面程序进行冻存：4℃ 1h，-20℃ 2h，-80℃过夜，然后转移至液氮灌中保存。冻存细胞储存在-80℃中通常不建议超过半年，时间太长会影响复苏效率。推荐使用碧云天的
BeyoCool™细胞冻存盒(FCFC012)
。e. 为保持细胞的良好状态，每隔1年，取出1-2支冻存的细胞复苏一次，并冻存新的细胞。
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| C0202 | 胰酶细胞消化液(0.05%胰酶) | 100ml |
| C0203 | 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶, 含酚红) | 100ml/500ml |
| C0204 | 胰酶细胞消化液(0.05%胰酶, 含酚红) | 100ml |
| C0205 | 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶, 不含EDTA) | 100ml |
| C0207 | 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶, 含酚红, 不含EDTA) | 100ml |
| C0208 | BeyoAOF™重组胰酶细胞消化液(含酚红) | 100ml/500ml |
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| C0220 | 7.5% NaHCO3溶液 | 100ml |
| C0221A | PBS | 500ml |
| C0221D | D-PBS | 500ml |
| C0221G | D-PBS (with Ca2+ & Mg2+) | 500ml |
| C0222 | 青霉素-链霉素溶液(100X) | 100ml |
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| FBX081 | 81孔液氮罐专用冻存盒 | 1个/包 |
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| FCD035 | BeyoGold™ 35mm细胞培养皿 | 10个/袋, 20袋/箱 |
| FCD060 | BeyoGold™ 60mm细胞培养皿 | 10个/袋, 20袋/箱 |
| FCD100 | BeyoGold™ 100mm细胞培养皿 | 10个/袋, 20袋/箱 |
| FCFC012 | BeyoCool™细胞冻存盒 | 1个 |
| FCP060 | BeyoGold™ 6孔细胞培养板 | 50个/箱 |
| FCP126 | BeyoGold™ 12孔细胞培养板 | 50个/箱 |
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| FCP485 | BeyoGold™ 48孔细胞培养板 | 50个/箱 |
| FCP962 | BeyoGold™ 96孔细胞培养板 | 50个/箱 |
| FCP966-80pcs | BeyoGold™全黑96孔细胞培养板 (平底带盖, 独立包装) | 80个/盒 |
| FCP966-320pcs | BeyoGold™全黑96孔细胞培养板 (平底带盖, 独立包装) | 320个/箱 |
| FCP968-80pcs | BeyoGold™全白96孔细胞培养板 (平底带盖, 独立包装) | 80个/盒 |
| FCP968-320pcs | BeyoGold™全白96孔细胞培养板 (平底带盖, 独立包装) | 80个/盒, 320个/箱 |
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| FFLK023 | BeyoGold™ 25cm2密封盖细胞培养瓶 | 10个/包, 200个/箱 |
| FFLK075 | BeyoGold™ 75cm2透气盖细胞培养瓶 | 5个/包, 100个/箱 |
| FFLK077 | BeyoGold™ 75cm2密封盖细胞培养瓶 | 5个/包, 100个/箱 |
| FFLK176 | BeyoGold™ 175cm2透气盖细胞培养瓶 | 5个/包, 40个/箱 |
| FFLK178 | BeyoGold™ 175cm2密封盖细胞培养瓶 | 5个/包, 40个/箱 |
| FPIP105 | BeyoGold™ 5毫升移液管(无菌, 独立纸塑包装) | 50个/包, 4包/箱 |
| FPIP110 | BeyoGold™ 10毫升移液管(无菌, 独立纸塑包装) | 50个/包, 4包/箱 |
| FPIP125 | BeyoGold™ 25毫升移液管(无菌, 独立纸塑包装) | 25个/包, 8包/箱 |
| FLFT021 | BeyoGold™ 21cm细胞铲(独立纸塑包装, 无菌) | 100个/盒 |
| FSCP023 | BeyoGold™ 23cm细胞刮(独立纸塑包装, 无菌) | 100个/盒 |
| FSCP029 | BeyoGold™ 29cm细胞刮(独立纸塑包装, 无菌) | 100个/盒 |
| FSTR040 | BeyoGold™细胞过滤器(40μm孔径, 独立纸塑包装, 无菌) | 100个/盒 |
| FSTR070 | BeyoGold™细胞过滤器(70μm孔径, 独立纸塑包装, 无菌) | 100个/盒 |
| FSTR100 | BeyoGold™细胞过滤器(100μm孔径, 独立纸塑包装, 无菌) | 100个/盒 |
| FTIP610 | BeyoGold™无菌盒装吸头(0.1-10μl, 无色) | 96个/盒, 50盒/箱 |
| FTIP616 | BeyoGold™无菌盒装低吸附吸头(0.1-10μl, 无色) | 96个/盒, 50盒/箱 |
| FTIP620 | BeyoGold™无菌盒装吸头(1-200μl, 黄色) | 96个/盒, 50盒/箱 |
| FTIP628 | BeyoGold™无菌盒装吸头(100-1000μl, 蓝色加长) | 96个/盒, 50盒/ 箱 |
| FTUB306 | BeyoGold™ 1.5毫升离心管(无色, Nuclease free) | 500个/盒, 10盒/箱 |
| FTUB515 | BeyoGold™ 15毫升锥形离心管 | 25个/包, 20包/箱 |
| FTUB550 | BeyoGold™ 50毫升锥形离心管 | 25个/包, 20包/箱 |
| ST488 | 细胞培养用青霉素-链霉素 | 可配制80L |
| ST875 | BeyoPure™ Ultrapure Water (细胞培养级) | 100ml/500ml |
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